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SP6 RNA Polymerase

SP6 RNA聚合酶

品牌
Roche
货号
RPOLSP6-RO
规格纯度
from Escherichia coli BL 21/pSR3
参考价格
5190.62 *本价格含增值税费
促销
数量
-+
产品介绍:

产品说明

一般描述

利用该系统能够获得均匀标记的单链RNA。转录物可以用生物素或DIG-11-UTP标记,或者使用[α-32P]或[α-35S]标记的核苷酸进行放射性标记,以获得高比活性。

内容物:

  • SP6 RNA聚合酶,≥20 U/μl,溶于缓冲液,pH 7.9
  • 转录缓冲液,10倍浓缩

特异性

启动子特异性

SP6 RNA聚合酶具有极强的启动子特异性,仅转录噬菌体SP6 DNA或SP6启动子下游的克隆DNA(例如pSPTBM20;pSPTBM21)。

热灭活:通过加入 2 μl 0.2 M EDTA(pH 8.0)和/或加热至65℃来终止反应。

应用

SP6 RNA聚合酶能够以转录SP6启动子下游的克隆DNA为模板,转录合成相应的RNA。可以用标记的NTP进行合成,获得高度标记的RNA。合成的RNA可用于许多应用,包括:

  • RNA或DNA印迹技术
  • 原位 杂交
  • RNA酶保护研究:由酶合成的转录物可用作前体RNA,以研究RNA剪接和加工。
  • 在转录反应期间,通过在GTP或ATP上过量添加m7GpppG或m7GpppA而在 体外 合成加帽RNA。将得到的反义RNA引入细胞,可抑制相应基因的表达。
  • 合成反义RNA探针

质量

测试缓冲液
40 mM Tris-HCl,pH 8.0 (+20℃),6 mM MgCl2,10 mM二硫苏糖醇,2 mM亚精胺,pH约为8.0 (+20℃).
无核酸内切酶
1.将1 μgλDNA和SP6 RNA聚合酶溶于25μl测试缓冲液,在+37℃下一起孵育4小时。酶单位数> 30 U代表无λDNA降解。
2.将1 μg λDNA的Eco RI/Hind III片段与SP6 RNA聚合酶溶于25μl测试缓冲液,在+37℃下一起孵育4小时。酶单位数> 30 U代表带型无变化。
无切割活性
将1 μg pBR322 DNA和SP6 RNA聚合酶溶于25μl测试缓冲液,在+37℃下一起孵育4小时。酶单位数> 30 U代表无超螺旋结构解旋。
无RNA酶
将4 μg MS2 RNA和SP6 RNA聚合酶溶于50μl测试缓冲液,在+37℃下一起孵育4小时。酶单位数> 30 U代表无MS2 RNA降解。
在转录分析中的性能
使用SP6/T7转录试剂盒(目录号10 999 644 001)对SP6 RNA聚合酶进行功能测试。使用0.5 μg pST18 neo DNA进行标准检测,用Eco RI酶切并使用50 mCi [alpha-32P] CTP, [400 Ci/mmol (15 TBq/mmol)]标记,20分钟内的掺入率给出>50%的输入放射性。

产品规格

杂交探针的合成: SP6 RNA聚合酶能够高效生产均匀标记的RNA。这种标记RNA可用作Southern、Northern和斑点印迹以及原位杂交的杂交探针。
合适的标记物:转录物可以用生物素-16-UTP、DIG-11-UTP或荧光素-12-UTP进行非放射性标记。还可以用 [a-32P]- 或[a-35S]-标记的核苷酸进行放射性标记,以获得高比活性。

注意:罗氏拥有10倍浓缩的RNA标记混合物,专为DIG-、生物素和荧光素标记而设计。这些混合物与SP6 RNA聚合酶配合良好。

单位定义

一个酶活性单位是在+37℃下,在60分钟内向酸可沉淀的RNA产物中掺入1 nmol CMP所需的酶活性。

体积活性:≥20 U/μl

制备说明

活化剂:BSA/精胺

其他说明

仅用于生命科学研究。不可用于诊断。

产品性质

质量水平100
形式solution
包装pkg of 1,000 U (10810274001)
pkg of 5,000 U (11487671001)
manufacturer/tradenameRoche
运输dry ice
储存温度−20℃

组份列表

组份不可单独销售

货号组份
SP6 RNA Polymerase, in buffer, pH 7.9 ≥20 U/μl
Transcription Buffer 10x concentrated

安全信息

象形图GHS07
警示用语:Warning
危险声明H319
预防措施声明P264 - P280 - P305 + P351 + P338 - P337 + P313
危险分类Eye Irrit. 2
储存分类代码12 - Non Combustible Liquids
WGKWGK 1
闪点(F)does not flash
闪点(C)does not flash

Sigma-Aldrich

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