产品说明
一般描述
使用该酶,可以产生同源标记的单链 RNA。转录物可以用生物素或 DIG-11-UTP 进行非放射性标记,或用 [α-32P]-或[α-35S] 标记的核苷酸放射性标记至高比活性。T3 RNA 聚合酶是一种 DNA 依赖性 RNA 聚合酶,对其启动子具有高特异性。只有位于 T3 启动子下游的 DNA 才会被转录。
特异性
启动子特异性
T3 RNA 聚合酶具有极高的启动子特异性,仅转录噬菌体 T3 DNA 或克隆到 T3 启动子下游的 DNA。
热失活:通过加入 2 μl 0.2M EDTA(pH8.0)和/或加热至 65℃ 来终止反应。
应用
T3 RNA 聚合酶可以从克隆 DNA 模板(位于 T3 启动子下游)转录 RNA。使标记的 NTP 可以合成高度标记的 RNA。合成的 RNA 可用于许多应用,包括:
- RNA 或 DNA 印迹技术
- 原位杂交
- RNase 保护研究:将酶合成的转录物用作前体 RNA,用于 RNA 剪接和加工的研究。
- 在转录反应期间,通过在 GTP 或 ATP 上过量添加 m7GpppG 或 m7GpppA,在体外合成加帽的 RNA。产生的反义 RNA 可导入细胞中,抑制相应基因的表达。
包装
1 个试剂盒包含 2 种组分
质量
根据当前的质量控制程序测试不含内切核酸酶、切割活性和 RNA 酶。使用 SP6/T7 转录试剂盒进行功能测试。
产品规格
体积活性: =20 U/μl
杂交探针的合成:T3 RNA 聚合酶允许高效产生均一标记的 RNA。该标记的 RNA 可用作 Southern、Northern 和斑点印迹中的杂交探针,以及原位杂交。
合适的标记:转录物可以用生物素-16-UTP、DIG-11-UTP 或荧光素-12-UTP 进行非放射性标记。它们还可以用 [a-32P]-或 [a-35S] 标记的核苷酸放射性标记至高比活性。
注意:罗氏拥有 10 倍浓缩的 RNA 标记混合物,专为 DIG-、生物素和荧光素标记而设计。这些混合物适用于 T3 RNA 聚合酶。
单位定义
一个单元是在 +37℃ 下,60 分钟内,在酸可沉淀的 RNA 产物中掺入 1 nMol CMP 的酶活性。
体积活性:≥20 U/μl
制备说明
活化剂:BSA/精胺
其他说明
仅用于生命科学研究。不可用于诊断。
基本信息
酶学委员会(EC)编号 | 2.7.7.6 ( BRENDA | IUBMB ) |
产品性质
质量水平 | 100 |
形式 | solution |
包装 | pkg of 1,000 U (11031163001) pkg of 5,000 U (11031171001) |
manufacturer/tradename | Roche |
运输 | dry ice |
储存温度 | −20℃ |
组份列表
组份不可单独销售
货号 | 组份 |
T3 RNA Polymerase, in buffer, pH 7.9 ≥20 U/μl | |
Transcription Buffer 10x concentrated |
安全信息
象形图 | |
警示用语: | Warning |
危险声明 | H319 |
预防措施声明 | P264 - P280 - P305 + P351 + P338 - P337 + P313 |
危险分类 | Eye Irrit. 2 |
储存分类代码 | 12 - Non Combustible Liquids |
WGK | WGK 2 |
闪点(F) | does not flash |
闪点(C) | does not flash |