产品说明
一般描述
SILu™Mab 是重组的、稳定的同位素标记的人单克隆抗体，其中掺入 [13C6，15N4]-精氨酸和 [13C6，15N2]-赖氨酸。SILuMab 在 CHO 细胞中表达，其经设计用作单克隆抗体生物分析的通用内标。由于 SILuMab 与候选抗体在 Fc 区中的共有序列重叠，因此它具有通用性，不需要生产候选抗体特异性内标。SILuMab 是具有 λ 轻链的 IgG1 抗体，但包含其他 IgG 同种型共有的肽序列。
应用
SILu™MAB 稳定同位素标记的通用人单克隆抗体标准品已用于自动抗体从头测序的比较研究中。
特点和优势
通用肽序列定位
DTLMISR重链(IgG1、IgG2、IgG3、IgG4)
FNWYVDGVEVHNAK重链(IgG1)
VVSVLTVLHQDWLNGK重链(IgG1、IgG3、IgG4)
NQVSLTCLVK重链(IgG1、IgG2、IgG3、IgG4)
GFYPSDIAVEWESNGQPENNYK重链(IgG1、IgG4)
AGVETTTPSK重链(λ)
YAASSYLSLTPEQWK重链(λ)
SILuMab 已通过基于 MRM 的 LC-MS/MS 被验证为定量复杂生物基质中相关生物治疗药物的内标。
- SILuMab 产生从 0.1 μg/mL 到 1000 μg/mL 的可重复的线性曲线，而没有富集或耗尽。
- 在同一目标衍生的多个肽之间观察到良好的一致性。
- 通过质谱确定标记掺入率 >98%。
- 通过肽图谱确认序列覆盖。
外形
以含有磷酸盐缓冲盐水的冻干粉形式提供
制备说明
利用含有稳定同位素标记的氨基酸的富集培养基生产的是 13C6, 15N4-标记的精氨酸和 13C6, 15N2-标记的赖氨酸
SILuMab 设计经过优化，可以用作定量单克隆抗体和 Fc 融合治疗的内标。由于与候选抗体在 Fc 区的通用序列重叠，因此 SILuMab 具有通用性，从而不需要产生候选抗体特异性内标。
重悬
当使用 0.1％ 的甲酸重悬冻干产品时，SILuMab 的回收率最高。用其他溶剂重悬可能会降低回收率。重悬后不要冷冻。
程序
- 将小瓶以约 10,000 x g 的速度短暂离心，在小瓶底部收集产品。
- 向小瓶中添加 500 μL 含 0.1％ 甲酸的纯净水。
- 轻轻颠倒样品瓶至少 5 次 混合内容物。
- 让小瓶在室温下静置至少 15 分钟，然后颠倒重复混匀。
分析说明
SILuMab 重链
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCVASGFTLNNYDMHWVRQGIGKGLEWVSKI
GTAGDRYYAGSVKGRFTISRENAKDSLYLQMNSLRVGDAAVYYCARGAGRW
APLGAFDIWGQGTMVTVSS|ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYF
PEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN
HKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISR
TPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRV
VSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPS
RDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFL
YSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG
SILuMab 轻链
QSALTQPRSVSGSPGQSVTISCTGTSSDIGGYNFVSWYQQHPGKAPKLMIY
DATKRPSGVPDRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCCSYAGDYTPGV
VFGGGTKLTVL|GQPKAAPSVTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTV
AWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQ
VTHEGSTVEKTVAPTECS
靶标重叠区域加了下划线
定性的
完整的重链和轻链(FASTA 文件)
定量的
提供 MRM 设置(Skyline，xls)
根据A280 使用 1.4 的消光系数(E0.1%)测定的蛋白质含量确定包装规格
法律信息
本产品已根据美国专利号 7,396,688 和 E. I. du Pont de Nemours and Company 的国外子公司许可使用。购买本产品将给买方不可转让的权利，将购买的数量的产品仅用于研发，包括第三方服务。买方不得将本产品，使用本产品或其组件制造的组件或材料出售或转让给第三方。有关排除用途的许可证的信息可从以下网站获得：E. I. du Pont de Nemours and Company；参加者：商业发展副主任；杜邦实验站 E268；200 Powdermill Rd； Wilmington，DE 19803；1-877-881-9787(语音)，1-302-695-1437(传真)，licensing@dupont.com。
SILu is a trademark of sigma-aldrich Co. LLC
基本信息
| NACRES | NA.12 |
产品性质
| 质量水平 | 200 |
| 重组 | expressed in CHO cells |
| 测定 | ≥90% (SDS-PAGE) |
| 包装 | vial of 100 μg (± 10% Lot-specific vial content given on certificate of analysis) |
| 运输 | wet ice |
| 储存温度 | −20℃ |
安全信息
| 储存分类代码 | 13 - Non Combustible Solids |
| WGK | WGK 3 |
| 闪点(F) | Not applicable |
| 闪点(C) | Not applicable |
