产品说明
一般描述
第二代 KAPA2G Robust DNA 聚合酶研发用于解决多种扩增子类型(富含GC和AT的扩增子)扩增不一致的问题。KAPA2G Robust HotStart® ReadyMix™ 具有更高的持续合成能力和特异活性，可实现稳健的PCR性能，灵敏度高，增强对常见抑制剂耐受性。KAPA2G Robust DNA 聚合酶的高性能非常适合具有挑战性的PCR应用和高难样品，无需使用多种酶和方案进行优化。
应用
KAPA2G Robust HotStart® ReadyMix™ 用于：
- 扩增富含 GC-或 AT-的模板
- 扩增含有常见聚合酶链反应(PCR)抑制剂的模板(抑制剂如盐、尿素、SDS或乙醇)
- 粗制样本 PCR(粗制样本如口腔拭子，培养的哺乳动物细胞、酵母细胞或细菌细胞)
- 菌落 PCR
- DNA 提取和扩增
- 突变筛查
- 甲基化特异性PCR(MSP)扩增
- 基因分型-PCR
- 基于PCR测序
生化/生理作用
用 KAPA2G Robust HotStart® DNA 聚合酶产生的DNA片段与用野生型Taq DNA 聚合酶产生的 DNA 片段具有相同特性，可用于限制性内切酶消化，克隆和测序等常规下游分析及应用。与野生型Taq一样，KAPA2G Robust HotStar 具有5'→3'聚合酶和5'→3'核酸外切酶活性，不具有3'→5'核酸外切酶(校对)活性。KAPA2G Robust HotStart 的保真度与野生型Taq相似。错误率约为每插入1.7 x 105个核苷酸产生1个错误。KAPA2G Robust HotStart产生的PCR产物带3'-dA尾，可以克隆到TA克隆载体。
特点和优势
高效扩增高GC和AT含量的靶标
- 在广泛的高GC和AT含量模板中表现稳健
- 提高 PCR 成功率
提高对普通 PCR 抑制剂的耐受性
- 从粗制样品高效扩增
- 单位酶的产率和灵敏度更高
菌落 PCR 中无与伦比的性能
- 直接来自 大肠杆菌 和酵母细胞的 PCR产率更高，一致性更好
临时速记：
- KAPA2G 耐用热启动 ReadyMix PCR 试剂盒包含 KAPA2G Robust DNA 聚合酶，专为高持续性和抑制剂耐受性而设计。
- 纯化的基因组 DNA 和粗制样品(例如菌落 PCR)均可用作模板。
- 每个循环使用 15 s/kb 的扩展时间，对于困难的扩增子或模板，增加到 30-60 s/kb。
- (1X) KAPA2G 耐用热启动 ReadyMix 含有 2 mM MgCl 2 。
- 带染料KAPA2G 耐用热启动 ReadyMix包括两种惰性追踪染料，可直接上样到琼脂糖凝胶上。
- KAPA2G 耐用热启动 ReadyMix 是单方案 PCR 的理想选择，即使用单反应设置和循环方案扩增 25-65%GC ，至 1 kb 不等的片段。
- 反应产物为 3′-dA-尾，可克隆至 TA 克隆载体。
质量
每批KAPA2G耐用热启动DNA聚合酶均被证实含有< 2%的污染蛋白(安捷伦蛋白质230分析)。KAPA2G 耐用热启动 ReadyMix PCR试剂盒经过严格的质量控制测试，不含污染性的外切和内切核酸酶活性，符合关于DNA污染水平的严格要求。
制备说明
使用前务必确保产品已经完全解冻和混合。试剂可储存在4℃条件下，以供短期使用(最长1个月)。返回-20℃条件进行长期储存。如果所有成分都经过小心处理且未被污染，试剂盒在室温下放置短时间(最长3天)预计不会受到损害。不建议在室温和4℃条件下长期储存。请注意，储存在-20℃以上条件下的试剂在使用过程中受到污染时更容易降解，因此储存在这种温度条件下的风险由用户自行承担。
其他说明
仅供研究使用。不用于诊断操作。
法律信息
HOTSTART is a registered trademark of Molecular BioProducts, Inc.
ReadyMix is a trademark of sigma-aldrich Co. LLC
基本信息
| NACRES | NA.55 |
产品性质
| 质量水平 | 100 |
| 用途 | sufficient for 100 reactions sufficient for 500 reactions |
| 保质期 | ≤12 mo. |
| 特点 | Difficult Templates/Specialty Enzymes PCR dNTPs included hotstart |
| 包装 | kit of 1.25 mL (100 x 25 μL rxn; KK5701) kit of 6.25 mL (500 x 25 μL rxn; KK5702) |
| manufacturer/tradename | Roche |
| 浓度 | 2 × ( contains 2 mM MgCl2 at 1×) |
| technique(s) | PCR: suitable |
| input | crude DNA |
| 运输 | dry ice |
| 储存温度 | −20℃ |
组份列表
组份不可单独销售
| 货号 | 组份 |
| KAPA2G Robust HotStart® DNA Polymerase 1U per 25 µL reaction | |
| MgCl2 2mM at 1X | |
| dNTP Mix 0.2 mM of each dNTP at 1X |
安全信息
| 象形图 |   |
| 警示用语： | Warning |
| 危险声明 | H302 - H371 |
| 预防措施声明 | P260 - P264 - P270 - P301 + P312 + P330 - P308 + P311 - P501 |
| 危险分类 | Acute Tox. 4 Oral - STOT SE 2 |
| 储存分类代码 | 12 - Non Combustible Liquids |
| WGK | WGK 1 |
| 闪点(F) | does not flash |
| 闪点(C) | does not flash |
