产品说明
一般描述
经过优化的WTA2,可对福尔马林固定的石蜡包埋样品(FFPE)和其他受损或降解样本中的RNA进行扩增。全转录组扩增(WTA)技术可在4小时内对ng级的总RNA进行无3′偏差的代表性扩增。扩增产物适用于qPCR、微阵列分析和克隆等应用。WTA2试剂盒含有cDNA文库扩增所需的聚合酶。
应用
完整全转录组扩增试剂盒用于:
- 建立同时分析猪粪DNA和RNA病毒的实验方案。(通过可控工艺深度测序同时鉴定猪粪中存在的DNA和RNA病毒)
- 逆转录和cDNA扩增
- 使用免疫捕获PPV颗粒中释放的RNA进行cDNA文库合成和扩增
- 核酸制备和深度测序(提取的核酸使用随机引物进行cDNA合成)
适于各种下游应用,包括:
- qPCR
- 微阵列分析
- 克隆
特点和优势
- 在4小时内实现高达10,000x的扩增,并且手动操作时间低于30分钟
- 仅需20 pg的总RNA模板,即可扩增出适用于微阵列分析的cDNA
- 含有cDNA扩增所需的所有元件
- 实现对表达基因和外显子的线性扩增,无3′或5′偏差
- 有效扩增单细胞或小量RNA,包括来自动物、植物或微生物的mRNA和总RNA。
原理
WTA2过程包括2个步骤。第一步,使用由拟随机3′端和通用5′端组成的非自身互补引物对样品RNA进行逆转录。在该过程中,被取代的单链将作为引物退火和延伸的新模板。所得OmniPlex cDNA文库由以通用末端序列为侧翼序列、含100-1000个碱基的随机重叠片段组成。第二步,使用WTA2聚合酶和通用末端引物对cDNA文库进行PCR扩增,生成WTA2产物。
基本信息
NACRES | NA.55 |
产品性质
质量水平 | 200 |
technique(s) | whole genome amplification: suitable |
运输 | wet ice |
储存温度 | −20℃ |
组份列表
组份可单独销售
货号 | 组份 |
Library Synthesis Enzyme | |
Library Synthesis Solution | |
Amplification Mix | |
Library Synthesis Buffer | |
W4502 | Water, Nuclease-Free Water, for Molecular Biology |
Amplification Enzyme | |
D7295 | Deoxynucleotide Mix, 10 mM, Molecular Biology Reagent |
安全信息
储存分类代码 | 10 - Combustible liquids |
WGK | WGK 3 |