产品说明
应用
来自组织溶梭菌的胶原酶已被用于:
- 从胶原蛋白支架中收获骨肉瘤143B细胞
- 胰岛和颈动脉的组织消化
- 绒毛膜绒毛的消化
- 基于ATP的肿瘤化学敏感性测定(ATP-TCA)中实体瘤的酶促解离
生化/生理作用
组织溶梭菌产生两类胶原酶。梭菌胶原酶比哺乳动物胶原酶更高效。它能够在胶原蛋白三螺旋中的多个切割位点进行切割。它与气性坏疽中的细菌入侵有关。
从组织中有效释放细胞需要胶原酶和中性蛋白酶的作用。每摩尔酶可被4克原子钙(Ca2+)活化。培养物滤液被认为含有至少7种不同蛋白酶,分子量范围为68-130kDa。最适pH为6.3-8.8。该酶通常用于消化组织样品中的结缔组分,以释放单个细胞。胶原酶处理可导致一些细胞死亡。通常使用0.1-5 mg/mL的浓度进行消化。反应持续时间从15分钟到几小时不等,以产生令人满意的细胞解离效率,同时又不会引起太多的细胞死亡。含有钙和BSA的Krebs Ringer缓冲液是首选,并且需要添加Zn2+以确保活性。在测试中,对于每个大鼠肝脏,使用该酶以约1 mg/mL的浓度、总体积100mL释放肝细胞。
每摩尔胶原蛋白酶被4g原子钙活化。 它被乙二醇-双(β-氨基乙基醚)-N,NN′,N′-四乙酸,β-巯基乙醇、谷胱甘肽、巯基乙酸和8-羟基喹啉抑制。
单位定义
一个胶原蛋白消化单元(CDU)从牛跟腱胶原蛋白中释放的肽链量和1.0 μ亮氨酸,5小时,pH7.4,37℃,在钙离子存在下的茚三酮颜色相同。一个 FALGPA水解单元每分钟,25℃,水解1.0 μmole 呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala。一个中性蛋白酶单元水解酪蛋白,产生颜色和1.0 μmole 酪氨酸每5小时,pH7.5,37℃下产生的相同。一个梭菌蛋白酶单元在DTT存在下,pH7.6,25℃,每分钟水解1.0 μmole BAEE。
基本信息
酶学委员会(EC)编号 | 3.4.24.3 ( BRENDA | IUBMB ) |
EC 号 | 232-582-9 |
MDL编号 | MFCD00130830 |
NACRES | NA.54 |
产品性质
质量水平 | 200 |
形式 | powder |
caseinase activity | ≥10 units/mg solid |
specific activity | ≥1.0 FALGPA units/mg solid |
分子量 | 68-130 kDa |
储存温度 | −20℃ |
安全信息
象形图 | |
警示用语: | Danger |
危险声明 | H334 |
预防措施声明 | P261 - P284 - P501 |
危险分类 | Resp. Sens. 1 |
储存分类代码 | 11 - Combustible Solids |
WGK | WGK 1 |
闪点(F) | Not applicable |
闪点(C) | Not applicable |
个人防护装备 | dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves |