产品说明

一般描述

胶原酶是一种蛋白酶，可切割三螺旋结构的蛋白，即胶原蛋白。组织胶原酶有三种类型，它们属于基质金属蛋白酶(MMP)家族。来自溶组织梭菌( Clostridium histolyticum )的胶原酶具有非常强的活性，它在低至4-10℃的温度下可从两端消化胶原蛋白。 粗制胶原酶混合物含有两种主要类型的酶，即胶原酶和梭菌蛋白酶。

应用

来自溶组织梭菌( Clostridium histolyticum )的胶原酶被用于以下应用：

• 足细胞分离
• 用于酶催化法的对比
• 用于免疫细胞化学的组织制备
• 睾丸精子提取
• 制备单细胞悬浮液
• 免疫荧光法

本品适用于人类肿瘤、小鼠肾脏、人类成人和胎儿的脑、肺和许多其他上皮组织的解离。 已有研究表明，胶原酶也能有效用于肝脏和肾脏灌注研究、胰腺消化、非实质大鼠肝细胞的分离以及肝细胞制备。 胶原酶也已用于为晚期糖基化终产物研究制备动脉组织。 经测试，用于消化肝细胞的酶浓度约为1 mg/mL。消化浓度范围为0.1至5 mg/mL。

生化/生理作用

胶原酶产品是一种由溶组织梭菌( C.histolyticum)分泌的酶的混合物，分泌酶中10-18种化合物成分的相对比例在不同产品中有所差异。 主要成分是两种胶原酶、梭菌蛋白酶和中性蛋白酶。 这些酶的协同作用可降解胶原蛋白和其他细胞内物质。胶原酶和中性蛋白酶的作用是细胞从组织有效释放所必需的。 各种类型的胶原蛋白是胶原酶的天然底物。
每摩尔胶原蛋白酶被4g原子钙活化。 它被乙二醇-双(β-氨基乙基醚)-N，NN′,N′-四乙酸，β-巯基乙醇、谷胱甘肽、巯基乙酸和8-羟基喹啉抑制。

注意

本品在-20℃下可稳定保存一年。在37℃、50℃和-20℃下保存30天，其FALGPA或蛋白酶活性没有损失。粗制胶原酶溶液分装品( 10 mg/mL)经快速冷冻可保持稳定，并且可在-20℃下冷冻保存。进一步冻融循环会损坏溶液。 本品在冰上放置7小时，可保留100％活性。

单位定义

一个胶原蛋白消化单元(CDU)从牛跟腱胶原蛋白中释放的肽链量和1.0 μ亮氨酸，5小时，pH7.4,37℃，在钙离子存在下的茚三酮颜色相同。一个 FALGPA水解单元每分钟，25℃，水解1.0 μmole 呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala。一个中性蛋白酶单元水解酪蛋白，产生颜色和1.0 μmole 酪氨酸每5小时，pH7.5,37℃下产生的相同。一个梭菌蛋白酶单元在DTT存在下，pH7.6,25℃，每分钟水解1.0 μmole BAEE。

制备说明

该胶原酶来自溶组织梭菌(Clostridium histolyticum)的培养滤液。培养滤液被认为含有至少7种不同蛋白酶，分子量范围为68-130 kDa。本品为I-A型。其溶液通常使用TESCA缓冲液(含有50 mM TES，0.36 mM氯化钙，在37℃时pH 7.4)制备，浓度为1-2 mg/mL。

基本信息

酶学委员会(EC)编号	3.4.24.3 ( BRENDA | IUBMB )
EC 号	232-582-9
MDL编号	MFCD00130830
NACRES	NA.75

产品性质

质量水平	200
生物来源	Clostridium histolyticum
类型	Type I-A
形式	lyophilized powder
specific activity	≥125 CDU/mg solid (CDU = collagen digestion units) 0.5-5.0 FALGPA units/mg solid
分子量	68-130 kDa
浓度	1 mg/mL
technique(s)	cell culture | mammalian: suitable
pH值(酸碱度)	6.3-8.8
web metadata keyword.default	collagen digestion, adherent cell release, cell passaging
运输	dry ice
储存温度	−20℃

安全信息

象形图
警示用语：	Danger
危险声明	H334
预防措施声明	P261 - P284 - P501
危险分类	Resp. Sens. 1
储存分类代码	11 - Combustible Solids
WGK	WGK 1
闪点(F)	Not applicable
闪点(C)	Not applicable
个人防护装备	dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves