产品说明
应用
已有研究采用牛胰腺脱氧核糖核酸酶I,研究了从牛胰腺中提取高活性RNase、DNase、胆固醇酯酶和胰蛋白酶的一个新途径。牛胰腺脱氧核糖核酸酶I也被用于研究鲤鱼肝脏DNase的分离和进一步的特性。
Sigma公司的DNAse I与人类尿液来源的白细胞介素1抑制剂相比,具有水解[14C]DNA [14C]的能力。它也被用来切割139个碱基对Hind III/Nci I限制性片段,以研究该酶用于足迹实验的稳定性。DNase I被广泛用作研究药物和蛋白质与DNA结合的印迹剂。
用于从蛋白质样品中除去 DNA。
生化/生理作用
DNase I是一种核酸内切酶,作用于嘧啶附近的磷酸二酯键,产生末端为5-磷酸的多核苷酸。在Mg2+存在时,DNAse I对每条DNA链进行独立的裂解,裂解位点是随机的。在Mn2+存在下,两条DNA链几乎在同一位点被裂解。其最佳pH值在7到8之间。二价阳离子,如Mn2+、Ca2+、Co2+和Zn2+是该酶的激活剂。浓度为5mM的Ca2+ 可以稳定酶的蛋白水解消化。牛胰腺DNA酶I由A、B、C、D四种色谱可分辨组分组成,摩尔比分别为4:1:1。仅发现少量的D。2-巯基乙醇、螯合剂、十二烷基硫酸钠(SDS) 和肌动蛋白 是已知的抑制该酶活性的物质。
单位定义
以I型或III型DNA作为底物时,在pH 5.0、37℃条件下,一单位Kunitz 每分钟可生成0.001/mL的ΔA260。(1单位 = 1 Kunitz单位)
外形
含氯化钙的冻干粉
制备说明
该酶粉可在pH值为4.0-9.0的水中或任何缓冲液中进行复溶,磷酸盐缓冲液除外。应避免钙螯合剂的存在。在0.15 M NaCl中加入10 mg/mL DNAse I溶液,在 −20℃的温度下保存一周,其活性可能会降低10%。同样的溶液分装储存在2-8℃中,其活性可降低约20%。它在60℃下,pH值5到7之间可保持活性长达5小时,在68℃时在<10分钟内失去活性。在醋酸盐缓冲液(pH 5.0)和tris缓冲液(pH 7.2)中,当浓度为1mg/mL时,其活性以6%/小时的速度丧失。
分析说明
双缩脲法测定蛋白质。
基本信息
酶学委员会(EC)编号 | 3.1.21.1 ( BRENDA | IUBMB ) |
EC 号 | 232-667-0 |
MDL编号 | MFCD00130918 |
NACRES | NA.54 |
产品性质
质量水平 | 300 |
无菌性 | sterile-filtered |
类型 | Type II-S |
形式 | lyophilized powder |
specific activity | ≥2,000 units/mg protein |
分子量 | ~31 kDa |
纯化方式 | chromatography |
组成 | Protein, ≥80% |
包装 | vial of ≥10.0 mg protein |
杂质 | endotoxin, tested |
溶解性 | 0.15 M NaCl: soluble 5.0 mg/mL, clear(lit.) |
application(s) | diagnostic assay manufacturing diagnostic assay manufacturing |
异质活性 | Chymotrypsin ≤0.01% Protease ≤0.005% RNase ≤0.01% |
储存温度 | −20℃ |
安全信息
象形图 | |
警示用语: | Danger |
危险声明 | H334 |
预防措施声明 | P261 - P284 - P501 |
危险分类 | Resp. Sens. 1 |
储存分类代码 | 11 - Combustible Solids |
WGK | WGK 3 |
闪点(F) | Not applicable |
闪点(C) | Not applicable |
个人防护装备 | Eyeshields, Gloves, type N95 (US) |