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CMV-CAS9-2A-GFP Plasmid

Cas9 质粒

品牌
Sigma-Aldrich
货号
CAS9GFPP
包装型号
规格纯度
参考价格
2486 *本价格含增值税费
促销
数量
-+
产品介绍:

产品说明

一般描述

Cas9表达质粒使用CMV启动子,以实现Cas9的强瞬时表达。可以使用MluI和NheI替换CMV来进行启动子替换。此外,Cas9表达质粒可以使用XbaI进行线性化,从而用于基于T7的mRNA生成。添加与Cas9核酸酶平移共表达的荧光团可以容易地实现成功转染的可视化。

应用

CMV-CAS9-2A-GFP 质粒已被用于诱导人类U937白血病细胞中的额外性梳样1( sex combs-like1 )突变。它也已用于CRISPR/Cas9分析。
CMV-CAS9-2A-GFP质粒适用于以下功能基因组学/靶点验证:

  • 在多种细胞系中创建基因敲除
  • 完全敲除不适合RNAi的基因
  • 通过整合到内源基因中的启动子、融合标签或报告基因创造基因敲入细胞系

组分

1管含1μg 的Cas9-2A-GFP质粒。
请注意,该产品不含向导RNA序列。向导RNA必须通过定制CRISPR产品选项卡单独购买。

原理

CRISPR/Cas被细菌和古细菌用作防御入侵病毒和质粒的防御系统。最近,来源于化脓性链球菌 的II型CRISPR/Cas系统已被设计为在真核系统中起作用,其使用两种分子组分:单一Cas9蛋白和非编码向导RNA(gRNA)。可以通过单个gRNA对Cas9内切核酸酶进行编程,从而将DNA双链断裂(DSB)导向所需的基因组位置。与由锌指核酸酶(ZFN)诱导的DSB类似,细胞随后激活内源DNA修复过程[非同源末端连接(NHEJ)或同源定向修复(HDR)],以愈合目标DSB。

其他说明

为了介导DNA双链断裂,必须与U6-gRNA质粒一起使用。
文献中使用的标准转染浓度范围为≥1.0 ug/μl且≤5 uL的Cas9质粒结合≥1.0 ug/μl且≤5 ul的U6-gRNA质粒。(上述所有浓度均假设是对0.5~1百万个细胞进行核转染)。

法律信息

CRISPR使用许可协议

基本信息

NACRESNA.51

产品性质

质量水平200
重组expressed in E. coli
包装vial of 50 μL
浓度20 ng/μL in TE buffer; DNA (1μg of plasmid DNA)
启动子Promoter name: CMV
报告基因GFP
selectionkanamycin
运输dry ice
储存温度−20℃

安全信息

储存分类代码12 - Non Combustible Liquids
WGKnwg
闪点(F)Not applicable
闪点(C)Not applicable

Sigma-Aldrich

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