产品说明
一般描述
对于定制的蛋白质生物素化,Sigma 提供了两种不同规格的结合试剂盒。该生物素-抗生物素蛋白系统具有灵敏度高、特异性强的特点。生物素可以与抗体、凝集素、酶和其他蛋白质结合。试剂盒中的实验方案已针对抗体进行了优化。抗生物素蛋白结合生物素亲和力高(Ka = 1015 M))、特异性强。当生物素蛋白与酶或荧光染料结合后,可通过酶促反应将底物底物转化为形成可见产物,或通过分光光度法或流式细胞术检测荧光来鉴定生物素化化合物。
应用
ImmunoProbe™生物素化试剂盒用于制备生物素标记抗体。
生物素经氨基己酸修饰,然后通过与磺基-N-羟基琥珀酰亚胺(BAC-Sulfo-NHS)的一个酯键结合活化。氨基己酸提供一个六碳间隔,可减少生物素的空间位阻,并改善抗生物素蛋白结合位点的可及性。羟基琥珀酰亚胺的磺化增加了试剂的极性,使其易溶于水性缓冲液。该酯提供了一个与不稳定酯键相邻的羰基碳,作为可接近赖氨酸残基的伯胺侧链的靶标,通过酰胺键连接生物素酰胺己酸与蛋白质。
特点和优势
- 完整的标记和分析方案
- BAC-Sulfo-NHS 完全溶于水
- 不需要 DMF 或 DMSO
- 在中性 pH 和生理离子强度下实现生物素化,无需使用严苛条件,避免了损伤敏感的蛋白
- 使用凝胶过滤快速分离结合物与反应物
- 结合物中的生物素与蛋白质(对于抗体)的摩尔比为 2 至 5
每次反应 1mg 蛋白质(B-TAG)
每次反应 10mg 蛋白质(BK-101)
• 试剂足够进行 5 次标记
包装
试剂盒包括生物素化和测定生物素/蛋白质摩尔比所需的全部试剂。
分析说明
步骤:
通过 4 个简单的步骤进行结合:
1.用磷酸盐缓冲液(PB)重悬 BAC-Sulfo-NHS。
2.将 BAC-Sulfo-NHS 加入蛋白质中,在室温下反应 30 分钟。
3.通过凝胶色谱法将结合物与反应物分离。
4.通过抗生物素蛋白-HABA 测定(仅 BK-101)测定用于生物素标记的结合物。结合物随时可用。
法律信息
ImmunoProbe is a trademark of sigma-aldrich Co. LLC
基本信息
eCl@ss | 34058011 |
NACRES | NA.32 |
产品性质
质量水平 | 200 |
储存温度 | 2-8℃ |
组份列表
组份可单独销售
货号 | 组份 |
P3813 | 0.01 M PBS, pH 7.4, powder 1 L |
H5126 | 4′-Hydroxyazobenzene-2-carboxylic acid (HABA) 1 mL/vial |
安全信息
象形图 | |
警示用语: | Danger |
危险声明 | H315 - H319 - H334 - H335 |
预防措施声明 | P261 - P264 - P271 - P280 - P302 + P352 - P305 + P351 + P338 |
危险分类 | Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3 |
靶器官 | Respiratory system |
储存分类代码 | 10 - Combustible liquids |
WGK | WGK 3 |