产品说明

一般描述

细胞内 pH 值变化涉及多种生理和病理过程，包括细胞增殖、凋亡、受精、恶性肿瘤、多药耐药、离子转运、溶酶体贮积症和阿尔茨海默病。
该试剂盒可利用简单的标准方案测量各种条件下处理的细胞内 pH 值的下降。或者，酸负荷程序可用于测量与 GPCR 活化、生长因子活性或其他细胞刺激引起的细胞代谢变化相关的细胞内 pH 值升高。在将荧光 pH 染料以最小体积加载至细胞后，加入酸负荷程序氯化铵溶液。在该酸负载步骤后，在相对较大体积 (~4x) 的缓冲液中加入激动剂。突然更改体积变化启动氨 (NH3) 从细胞外流，导致细胞内 pH 值迅速降低，从而降低荧光信号。激动剂对随后细胞内 pH 值恢复的影响通过相对荧光信号增加进行测量。

应用

荧光细胞内 pH 测定试剂盒已用于测量细胞内 pH 值。

特点和优势

比BCECF更好的替代物

适用性

本试剂盒可用于测定不同条件下细胞内的pH变化。

原理

荧光细胞内 pH 值测定试剂盒采用专有的细胞渗透性荧光指示剂 BCFL-AM，用于测量细胞内相对 pH 值变化。BCFL-AM 是常用的比率 pH 探针 2′,7′-双-(2-羧乙基)-5 (6)-羧基荧光素 (BCECF) 的较优替代品。与 BCECF 不同，BCECF 是一种复杂多变的异构体混合物，BCFL-AM 是一种单一异构体物质。BCFL-AM 具有与 BCECF-AM 相同的光谱响应(λ _ex = 490 nm/λ _em = 535 nm，用于单次测量或 λ _ex = 505 nm/λ _em = 535 nm 和 λ _ex = 430 nm/λ _em = 535 nm，用于比率测量)，但增强了重现性。BCFL-AM 表现出 pH 依赖性的双重兴奋性，pKa~7.0, 激发等位点为 454 nm。

产品性质

安全信息