基本信息
| 分子式 | C17H15BrClFN4O3 |
| 分子量 | 457.68 |
| 存储条件 | Freezer -20℃ |
产品描述
Selumetinib (AZD6244)是一种有效，高选择性的MEK抑制剂，对MEK1的IC50为14 nM，对MEK2的Kd值为530 nM。它也抑制ERK1/2磷酸化，IC50为10 nM，对p38α， MKK6， EGFR， ErbB2， ERK2， B-Raf等没有抑制作用。Phase 3。
靶点（IC50 & Targe）
MEK1,14nM
体外研究
AZD6244是ATP非竞争性的抑制剂，在IC50浓度小于40 nM时使ERK1/2的磷酸化作用失活。AZD6244也通过抑制ERK1/2和p90RSK的磷酸化抑制原代HCC细胞的生长，同时伴随着caspase-3和caspase-7分裂的加强, 及断裂的聚腺苷二磷酸核糖聚合酶的增多。AZD6244在P38，JNK，PI3K，及MEK5/ERK5通路中的作用不大。[1]AZD6244对感知乳腺癌细胞系中的raf突变和非小细胞肺癌细胞系中的ras突变很灵敏。[2]
体内研究
活体研究显示AZD6244在2-1318, 5-1318, 及26-1004 4-1318移植物中明显抑制ERK1/2的磷酸化，并且在原代2-1318细胞中通过激活caspase通路诱导细胞凋亡。[1]HT-29移植瘤是携带B-raf突变的直肠瘤模型，AZD6244 在100mg/kg剂量时可以抑制HT-29移植瘤中肿瘤的增长，并且AZD6244作用下的肿瘤指数比吉西他滨作用下的肿瘤指数要好[3]。另外，AZD6244可以抑制HCC移植瘤的增长，HCC移植瘤的增长与细胞凋亡的增多，及细胞周期调控的减量调节有关。包括：cyclin D1, cdc-2, CDK 2 ,CDK4, cyclin B1, 及 c-Myc。[4]
激酶实验
激酶实验:
在杆状病毒感染的hi5昆虫细胞中表达的组成型的氮端用六聚组氨酸标记的MEK1，通过金属亲和层析、离子交换及凝胶过滤纯化。MEK1的活性评估通过测量γ-33PATP 作用于ERK2的示踪γ-33P磷酸的渗透率。实验在96孔板中进行，保温混合物由25 mM HEPES (pH 7.4), 10 mM MgCl2, 5 mM β-甘油磷酸 100 μM 原钒酸钠, 5 mM DTT, 5 nM MEK1, 1 μM ERK2, 和AZD6244 (溶解在 1% DMSO)组成。加入10 μM ATP (0.5 μC kγ-33PATP/每孔)反应开始，然后在室温下温育45分钟。加入同等量的25%的三氯乙酸反应停止，使蛋白沉淀。沉淀的蛋白加到玻璃纤维过滤板上，用0.5%的磷酸冲洗掉过量的示踪ATP，然后在液体闪烁计数管中计算放射性。通过在反应混合物中改变ATP的量来决定ATP相关性。
细胞实验
Cell lines: 原代HCC细胞系包括2-1318, 4-1318和26-1004细胞
Concentrations: 10 μM 左右
Incubation Time: 24或48小时
Method:肿瘤细胞按2.0×104密度接种，温育48小时，然后用培养基清洗细胞两次。用不同浓度的AZD6244处理细胞24小时或者48小时。细胞活力通过MTT实验来测定。用溴脱氧核苷尿嘧啶试剂盒测定细胞增殖。
(Only for Reference)
动物实验
Animal Models: 携带HCC移植瘤的SCID鼠
Formulation: 溶于水中
Dosages: 50或100mg/kg
Administration: 口服处理
(Only for Reference)
参考文献
[1] Huynh H, et al, Mol Cancer Therapy, 2007, 6 (1), 138-146
[2] Garon EB, et al, Mol Cancer Thera, 2010, 9 (7), 1985-1994.
[3] Yeh TC, et al, Clin Cancer Res, 2007, 13 (5), 1576-1583.
[4] Huynh H, et al, Mol Cancer Ther, 2007, 6 (9), 2468-2476.
[5] Davies BR, et al. Mol Cancer Ther, 2007, 6(8), 2209-2219.
[6] Morelli MP, et al. Clin Cancer Res, 2012, 18(4), 1051-1062.
[7] Yuen JS, et al. Int J Oncol, 2012, 41(2), 712-720.
[8] Leboeuf R, et al. J Clin Endocrinol Metab, 2008, 93(6), 2194-2201.
[9] Emery CM,, et al. Proc Natl Acad Sci U S A, 2009, 106(48), 20411-20416.
[10] Friday BB, et al. Cancer Res, 2008, 68(15), 6145-6153.
[11] Huynh H, et al. J Hepatol, 2010, 52(1), 79-87.
[12] Diep CH, et al. Clin Cancer Res, 2011, 17(9), 2744-2756.
[13] Davis MI, et al. Nat Biotechnol. 2011, 29(11):1046-51.
