产品及特点

白色念珠菌(Canidia albicans)又叫白假丝酵母菌是一种真菌，通常存在于正常人口腔，上呼吸道，肠道及阴道，一般在正常机体中数量少，不引起疾病，当机体免疫功能或一般防御力下降或正常菌群相互制约作用失调，则本菌大量繁殖并改变生长形式(芽生菌丝相)侵入细胞引起疾病。其中包括皮肤念珠菌病(好发于皮肤皱褶处，皮肤潮红、潮湿、发亮，有时盖上一层白色或呈破裂状物，病变周围有小水泡)、粘膜念珠菌病(以鹅口疮、口角炎、阴道发炎最多见)、内脏及中枢神经念珠菌病(可由粘膜皮肤等处病菌播散引起，有肺炎、肠胃炎、心内膜炎、脑膜炎、脑炎等，偶尔也可发生败血症)。因此快速灵敏检测梭状芽孢杆菌具有重要的意义，本试剂盒就是为此目的根据 PCR原理开发，它具有下列特点：

1、即开即用，用户只需要提供细菌 DNA模板。

2、引物经过精心优化，专一性强，只扩增白色念珠菌 DNA。

3、提供阳性对照，便于区分假阴性样品。

4、PCR mix中含上样染料，PCR后可以直接上样电泳。

5、本试剂盒足够做 40μL体系的 PCR 50次。

6、本产品只能用于科研。

规格及成分

运输及保存

低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其他试剂。

自备试剂

样品 DNA。

使用方法

一、样品 DNA的制备

1、如果有 N个样品，必须设置 N+2个提取，多出的一个是 PC(样品制备阳性对照)，一个是 NC(样品制备阴性对照)。可以用 10μL阳性对照的 100倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样，以此作为 PC。另外用水作为 NC。

2、用自选方法纯化样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数细菌 DNA提取试剂盒兼容。也可以选购本公司的细菌 DNAout或柱式细菌 DNAout。本试剂盒免费赠送 20次免 DNA提取的核酸释放剂，本产品的裂解液可以直接作为 PCR模板，省略了DNA提取步骤。

二、设置 PCR反应(40  μL体系)

3、对 N+2个样品，在 PCR时需要增加一个 PCR阳性对照和一个 PCR阴性对照，故需要设置 N+4个反应。在 N+4个 PCR管中分别加入下列成分：

4、按下表设置 PCR反应：

三、电泳检测

5、取 10-20  μL  PCR产物。电泳检测 PCR产物。本产品提供的 PCR  Mix在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。预期的 PCR产物长度为 263bp。阳性对照必须有此条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10倍后重复 PCR扩增以排除 PCR抑制剂的感染。