牛疱疹病毒1型PCR试剂盒
产品名称 Bovine Hepervirus 1 PCR Kit BHV-1 PCR Kit 产品介绍
产品及特点 牛疱疹病毒 1型(Bovine herpesvirus 1,BoHV-1)引起牛的传染性鼻气管炎,又称坏死性鼻炎、红鼻病,表现上呼吸道及气管黏膜发炎、呼吸困难、流鼻汁等症状,BHV-1还可引起生殖道感染、结膜炎、脑膜脑炎、流产、乳房炎等多种病症。该病被 OIE列为 B类传染病,也被我国列为二类动物传染病,其易感染性和潜伏性给畜牧业以及国际贸易带来严重的经济损失,因此牛疱疹病毒 1型的快速准确鉴定对该病的预防和检疫有着重要作用,本产品具有下列特点: 1、即开即用,用户只需要提供病毒 DNA模板。 2、引物经过精心优化,专一性强,只扩增牛疱疹病毒 1型 DNA,与其他病毒没有交叉反应。 3、提供阳性对照,便于区分假阴性样品。 4、PCR mix中含上样染料,PCR后可以直接上样电泳。 5、本试剂盒足够做 40μL体系的 PCR 50次,但只能用于科研。 规格及成分
运输及保存 低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。牛腺病毒 PCR阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。 自备试剂 样品 DNA。 使用方法 一、样品 DNA的制备 1、用自选方法纯化 N+2个样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA提取试剂盒兼容。本试剂盒免费赠送 15次核酸释放剂试用装。 2、如果有 N个样品,则需要做 N+2个提取,包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在 200μL水中加 10μL牛腺病毒 PCR阳性对照的 10000倍稀释液而得,样品制备阴性对照是直接用 200μL水。提取结束后最后得到 200μL模板 DNA(每个样品)放冰上待用,溶解 DNA沉淀的溶液不能少于 200μL,否则 PCR抑制物很可能会抑制 PCR。 二、设置 PCR反应(40μL体系) 3、对 N+2个样品,在 PCR时需要增加一个 PCR阳性对照和一个 PCR阴性对照,故需要设置 N+4个反应。在 N+4个 PCR管中分别加入下列成分:
4、按下表设置 PCR反应:
三、电泳检测 5、取 10-20 μL PCR产物。电泳检测 PCR产物。本产品提供的 PCR Mix在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。预期的 PCR产物长度为 319bp。阳性对照必须有此条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10倍后重复 PCR扩增以排除 PCR抑制剂的感染。 |
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