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禽疱疹病毒通用PCR试剂盒
包装:50次


产品名称
Avian Herpesvirus(Gallid Herpesvirus) PCR Kit
GaHV PCR Kit
产品介绍

产品及特点

禽疱疹病毒(Avian Herpesvirus,Gallid Herpesvirus,GaHV)会引起众多禽类感染病,如鸡马立克氏病,其特征为外周神经淋巴样细胞浸润和增大,引起肢(翅)麻痹,以及性腺、虹膜、各种脏器、肌肉和皮肤肿瘤病灶。本病是一种世界性疾病,目前是危害养鸡业健康发展的三大主要疫病(马立克氏病、鸡新城疫及鸡传染性法氏囊病)之一,引起鸡群较高的发病率和死亡率,对养殖业造成严重损害,因此禽疱疹病毒的快速准确鉴定对该病的预防和检疫有着重要作用,为此本公司开发了简单快捷的禽疱疹病毒通用  PCR检测试剂盒,它具有下列特点:

1、即开即用,用户只需要提供病毒 DNA模板。

2、引物经过精心优化,专一性强,只扩增禽疱疹病毒,但跟其他微生物无交叉反应。

3、提供阳性对照,便于区分假阴性样品。

4、 PCR mix中含上样染料,PCR后可以直接上样电泳。

5、本试剂盒足够做 40μL体系的 PCR 50次。

6、本产品只能用于科研。

规格及成分

成份编号十孔盒包装
PCR MagicMix 3.0908051  mL(红盖)
超纯水1009351  mL(亮黄盖)
禽疱疹病毒通用 PCR引物混合液13-74700yw100  μL(白盖)
禽疱疹病毒通用 PCR阳性对照(1×108拷贝/μL)13-74700pc50  μL(黄盖)
核酸释放剂(试用装)6120220次(1mL、绿盖
使用手册13-74700sc1份

运输及保存

低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。

自备试剂

样品 DNA。

使用方法

一、样品 DNA的制备

1、如果有 N个样品,必须设置 N+2个提取,多出的一个是 PC(样品制备阳性对照),一个是 NC(样品制备阴性对照)。可以用 10μL的阳性对照再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此作为 PC。另外用水作为 NC。

2、用自选方法纯化样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA提取试剂盒兼容。也可以选购本公司的病毒 DNAout或柱式病毒 DNAout。本试剂盒免费赠送 20次免 DNA提取的核酸释放剂,本产品的裂解液可以直接作为 PCR模板,省略了 DNA提取步骤。

二、设置 PCR反应(40 μL体系)

3、对 N+2个样品,在 PCR时需要增加一个 PCR阳性对照和一个 PCR阴性对照,故需要设置 N+4个反应。在 N+4个 PCR管中分别加入下列成分:

成分N+2个样品管PCR阴性对照管PCR阳性对照管
PCR MagicMix 3.0各 20 μL20 μL20 μL
禽疱疹病毒 PCR引物混合液各 2 μL2 μL2 μL
N+2个样品 DNA模板各 18 μL--
PCR阴性对照(超纯水)-18 μL-
PCR阳性对照(禽疱疹病毒通用PCR阳性对照)--18 μL

4、按下表设置 PCR反应:

过程温度时间
预变性95℃5 min
PCR反应(35个循环)95℃30 sec
PCR反应(35个循环)50℃30 sec
PCR反应(35个循环)72℃30 sec
最后延伸72℃5 min

三、电泳检测

5、取 10-20 μL PCR产物。电泳检测 PCR产物。本产品提供的 PCR  Mix在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。预期的 PCR产物长度为 250 bp。阳性对照必须有此条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10倍后重复 PCR扩增以排除 PCR抑制剂的感染。

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