土壤多酚氧化酶(S-PPO)活性检测试剂盒(可见分光光度法)
产品介绍
注意:正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。 S-PPO主要来源于土壤微生物、植物根系分泌物及动植物残体分解释放,催化土壤中芳香族化合物氧化成醌,醌与土壤中蛋白质、氨基酸、糖类、矿物等物质反应生成有机质和色素,完成土壤芳香族化合物循环,用于土壤环境修复。 S-PPO能够催化邻苯三酚产生紫色没食子素,后者在430nm有特征光吸收。 产品内容: 试剂一:粉剂×2瓶,临用前加入15ml蒸馏水,用不完的试剂仍4℃保存; 试剂二:液体10ml×1瓶,4℃保存; 试剂三:乙醚,4℃保存(自备) ;重铬酸钾标准液:液体10ml×1瓶,重铬酸钾溶液(5mmol/L),相当于0.2mg/ml紫色没食子素溶液。 标准品稀释: 用0.5mol/L HCL溶液将标准液稀释至0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125、0.00625、0.003125、0mg/ml。 需自备的仪器和用品: 可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1ml比色皿、乙醚(不允许快递)、冰和蒸馏水。 操作步骤: 1、可见分光光度计预热30min以上,调节波长至430nm,蒸馏水调零。 2、标准曲线的建立:取1ml稀释好的标准液于比色皿在430nm处测定吸光值A,根据吸光度(x)和浓度(y,mg/ml)做出标准曲线。 3、样本测定表
振荡数次,室温静置30min,取1ml上层液于430nm处测定吸光值A。 S-PPO活性计算:根据标准曲线,将样品吸光值A带入公式中(x),计算出样品浓度 y(mg/ml)。 单位的定义:每天每g土样中产生1mg紫色没食子素定义为一个酶活力单位。 S-PPO(U/g土样)=y×V提取相÷W÷T =840×y T:反应时间,1h=1/24d;V提取相:1.75ml;W:样品质量,0.05g。 |
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