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麦芽糖含量测试盒(可见分光光度法)
货号:MT-2-D
包装:50管/24样


产品介绍

正式测定前务必取 2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

麦芽糖是由两个葡萄糖单位经由α-1,4糖苷键连接而成的二糖,又称麦芽二糖。麦芽糖是淀粉、糖原、糊精等大分子多糖类物质在β-淀粉酶催化下的主要水解产物,再经麦芽糖酶催化,则被水解成两个葡萄糖分子。麦芽糖不仅参与了生物体内糖代谢,其在食品和医药工业等行业也着广泛应用,是产品质量控制的重要指标之一。

测定原理:

麦芽糖酶将样品中麦芽糖水解为葡萄糖;葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸,并产生过氧化氢;过氧化物酶催化过氧化氢氧化 4-氨基安替比林偶联酚,生成有色化合物,在 505 nm有特征吸收峰。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵和蒸馏水

试剂的组成和配制:

试剂一:液体 35mL×1瓶,4℃保存;

试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前加 3 mL试剂一溶解后待用,用不完的试剂分装后-20℃保存;

试剂三:液体 25ml×1瓶,4℃保存;

试剂四:液体 25ml×1瓶,4℃保存;

麦芽糖提取:

按照样本质量(g):试剂一体积(mL)为 1:5~10的比例(建议称取约 0.1g组织,加入 1mL试剂一),研磨成匀浆,95℃水浴 10分钟(盖紧,防止水分散失),冷却后,8000g,25℃离心 10min,取上清液备用。

测定步骤:

1、分光光度计预热 30min以上,调节波长至 505nm,蒸馏水调零

2、混合试剂的配制:使用前将试剂三和试剂四 1:1等体积混合,用多少配多少。

3、测定管:取 200μL上清,加入 100μL试剂二,混匀,55℃反应 60 min,待测。对照管:取 200μL上清,加入 100μL试剂一,混匀,55℃反应 60 min,待测。

4、加样表(在 EP管中加入下列试剂):

试剂(μL)测定管对照管
测定管待测液200
对照管待测液
200
混合试剂800800

混匀,40℃保温 30 min后,于 505nm波长处读取吸光度。测定管和对照管吸光值分别记为A测定和 A对照。ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管设一个对照管。

麦芽糖含量计算:

标准条件下测定回归方程为 y = 5.7888x + 0.0052;R2 = 0.9997;x为标准品浓度(mg/mL),y为吸光值差值。

麦芽糖(mg/g鲜重)=(ΔA-0.0052)÷5.7888×V总÷W=0.1728×(ΔA-0.0052)÷W

V总:加入提取液体积,1 mL;W:样本质量,g

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