收到细胞后，在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况。之后用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液到无菌的离心管内，1000转/分离心10分钟后弃上清，加新配的完全培养液10ml接种到培养瓶内培养(如果细胞多，也可接种两瓶)。原瓶换 10ml新鲜培养液后继续培养。 细胞传代时，只要轻拍培养瓶后加够培养液一分为二即可。如果有些细胞拍打不下来，可按以下方法做： 1.吸出拍打下的细胞悬液，用不含钙、镁离子的PBS洗1-2次。 2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，倒转放于37℃培养箱1-3分钟预热，然后将培养瓶翻过来让胰酶与细胞面接触大约10-30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加6-8ml/瓶完全培养基即可。 注：1、观察细胞**在低倍镜(4或5X物镜)下进行，否则不能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X物镜下。 2、瓶中运输培养基不能重复再用,请换用加双抗的新培养基，细胞冻存后,培养基中可不加任何抗生素。 3、有些细胞贴壁不牢，如发现贴壁细胞有脱落，可离心吹打后接种到新瓶内。 4、收到细胞后，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请及时与我们联系。 | 
