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钙螯合剂BAPTA, AM
货号:3985688
品牌:GOYOO
纯度含量:≥95%
包装:25mg
CAS NO:126150-97-8


产品名称
BAPTA, AM
产品介绍
外观白色粉末
分子式C34H40N2O18
分子量764.68
储存条件-20℃干燥避光保存
运输条件常温
保质期12个月

BAPTA, AM是一种细胞内钙离子选择性螯合剂。它穿透细胞膜进入细胞后被细胞内的酯酶剪切形成BAPTA,从而被滞留在细胞内。BAPTA基本的螯合单位和EDTA类似,只是两个脂肪氮被芳香氮所替代。因此,BAPTA在生理pH下不会被质子化。BAPTA的pKa3为5.47,pKa4为6.36。这个特点显示了去质子化的步骤并不包含在钙的螯合步骤中。由于不受质子的干扰,它的螯合率比EGTA高很多。

使用方法

(1) 溶解方法

将25mg BAPTA, AM加入到 654μL无水DMSO中,配制50 mM stock solution。

保存stock solution的方法和保存时间*

A、由于AM体遇水容易分解,所以我们推荐现配现用。

B、使用无水DMSO,在冷冻的条件下,可以保存约1~2个月。

(2) 使用方法

稀释stock solution,添加细胞。

稀释浓度:少的 6~8 μM,多的50 μM

* 由于BAPTA, AM是非水溶性,稀释时先再添加DMSO后,添加水溶液(特别是使用培养液时)。不然的话,BAPTA, AM的结晶有可能出来。关于添加的DMSO的量,考虑细胞的毒性,应该低于1%以下。

* 由于BAPTA, AM是非水溶性,所以稀释时慢慢添加水溶液。

* 如果不想再添加DMSO的话,也有添加Pluoronic F127的方法。添加Pluoronic F127时,先添加到母液后,使用PBS等水溶液稀释。

* stock solution和PBS等水溶液混合时,将stock solution添加到PBS等水溶液里。

例1) 10 μM,使用2 μL 50 mM BAPTA, AM stock solution

再添加的DMSO量:0μL(DMSO最终浓度:0.02 %)

添加的水溶液的量:10 mL

 方法:2 μL BAPTA, AM stock solution +10 mL PBS等水溶液

例2) 25 μM,使用5 μL 50 mM BAPTA, AM stock solution

再添加的DMSO量:95 μL(DMSO最终浓度:1%)

添加的水溶液的量:10 mL

  方法:(1) 5 μL BAPTA, AM stock solution + 95 μL DMSO

(2) 10 mL PBS等水溶液 + 100μL 的(1)

关于细胞的量,不同的细胞使用不同的细胞量。一般来说,Fura-2, AM及Fluo-3, AM一样的量*

论文里面有如下的条件,请参考。

例1) 1.75×10-4 cells/cm2,25 μM BAPTA, AM

培养时间:20~60 分钟

* 如果培养时间太长的话,很多BAPTA, AM进入细胞内,对细胞不好(毒性高)。

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