限制性内切酶BsmFI

• 在 rCutSmart^™ 缓冲液中具有 100% 活性（超过 210 种内切酶兼容于此缓冲液），便于进行双酶切
• IIS 型限制性内切酶能识别非回文 DNA 序列，并在识别序列之外进行切割
• 限制性内切酶酶切位点：GGGAC(10/14)

产品来源

大肠杆菌菌株，携带有克隆自嗜热脂肪芽孢杆菌（Bacillus stearothermophilus ）F（ER2683）的 BsmFI 基因

• 特性和用法

  单位定义

  一个单位是指在 50 µl 的总反应体系中，65℃ 下，1 小时内酶切 1 µg pBR322 DNA 所需的酶量。

  反应条件

  1X rCutSmart™ 缓冲液
  Incubate at65℃

  1X rCutSmart™ 缓冲液
  50 mM Potassium Acetate
  20 mM Tris-acetate
  10 mM Magnesium Acetate
  100 µg/ml Recombinant Albumin
  (pH 7.9 @ 25℃)

  在不同缓冲液中的活性

  NEBuffer™ r1.1: 25%
  NEBuffer™ r2.1: 50%
  NEBuffer™ r3.1: 50%
  rCutSmart™ Buffer: 100%

  稀释兼容性

  • 稀释液 A

  贮存溶液

  10 mM Tris-HCl
  50 mM NaCl
  1 mM DTT
  0.1 mM EDTA
  200 µg/ml BSA
  50% Glycerol
  pH 7.4 @ 25℃

  热失活

  80℃ for 20 minutes

  甲基化敏感性

  dam 甲基化: 不敏感
  dcm 甲基化: 甲基化与酶切位点重叠阻断酶切
  CpG甲基化: 甲基化与酶切位点重叠阻断酶切

  同裂酶

  BslFI
  FaqI
  FinI+
  

  在不同温度下的活性

  @37℃: 100%

• 注意事项
  1. BsmFI 是 FinI 的同裂酶。
  2. 已证明 BsmFI 有时可以酶切序列 GGGAC(9/13)。尚不确定这种情况发生的确切频率。
  3. 不建议温育超过 4 个小时。
  4. dcm 和 CpG 甲基化与酶切位点的重叠组合阻断酶切。
  5. 延长酶切时间、高浓度酶或 >5% 的甘油浓度可能产生星号活性